Qonda OIV antikorlarining paydo bo'lishiga nima sabab bo'ladi? Elishay diagnostikasi: mohiyati nima, antikorlarni aniqlash, u qanday amalga oshiriladi va qaysi kasalliklar uchun samarali

Elishay (ferment bilan bog'langan immunosorbent tahlili, Elishay) amaliy tibbiyot hayotiga o'tgan asrning 60-yillarida kirib kelgan. Uning dastlabki vazifasi tirik organizm hujayralarining antigenik tuzilishini izlash va aniqlashgacha bo'lgan ilmiy maqsadlar uchun gistologik tadqiqotlar edi.

Elishay usuli o'ziga xos (AT) va tegishli antigenlarning (AG) ferment yordamida aniqlanadigan "antigen-antikor" kompleksining shakllanishi bilan o'zaro ta'siriga asoslangan. Bu fakt olimlarni ushbu usul diagnostika maqsadida ma'lum bir infektsiyaga qarshi immunitet reaktsiyasida ishtirok etadigan turli sinflarning o'ziga xos immunoglobulinlarini aniqlash uchun ishlatilishi mumkin deb o'ylashga undadi. Va bu klinik laboratoriya diagnostikasida yutuq bo'ldi!

Usul faqat 80-yillarning boshlarida, keyin esa asosan ixtisoslashgan muassasalarda faol qo'llanila boshlandi. Birinchi immunoenzim analizatorlari qon quyish markazlari va stantsiyalari, yuqumli kasalliklar va venerologiya shifoxonalari bilan jihozlangan edi, chunki Afrika qit'asida tug'ilgan dahshatli OITS bizning ufqimizda paydo bo'ldi va darhol "eski" infektsiyalarga qo'shildi, shoshilinch diagnostika choralari va qidiruvni talab qildi. unga ta'sir qiluvchi terapevtik preparatlar uchun.

Elishay usulini qo'llash doirasi

Ferment immunoassay imkoniyatlari haqiqatan ham keng. Tibbiyotning barcha sohalarida tom ma'noda qo'llaniladigan bunday tadqiqotlarsiz qanday qilish mumkinligini endi tasavvur qilish qiyin. Ko'rinishidan, Elishay onkologiyada nima qila oladi? Ma'lum bo'lishicha, mumkin. Va juda ko'p. Tahlilning malign neoplazmalarning ayrim turlariga xos bo'lgan belgilarni topish qobiliyati o'simtaning kichik o'lchamlari tufayli boshqa yo'l bilan aniqlanmagan bo'lsa, uni erta aniqlashga asoslanadi.

Zamonaviy klinik laboratoriya diagnostikasi (CDL), o'simta belgilaridan tashqari, Elishay panellarining sezilarli arsenaliga ega va ulardan turli patologik sharoitlarni (yuqumli jarayonlar, gormonal kasalliklar) diagnostika qilish va bemorning tanasiga ta'sirini aniqlash uchun farmatsevtika preparatlarini kuzatish uchun foydalanadi. va, aytmoqchi, nafaqat inson. Hozirgi vaqtda immunoassay fermenti veterinariya xizmatlarida keng qo'llaniladi, chunki "bizning kichik birodarlar" ham ko'plab kasalliklarga moyil bo'lib, ular ba'zan juda ko'p azob chekishadi.

Shunday qilib, Elishay sezgirligi va o'ziga xosligi tufayli venadan olingan qon namunasidan quyidagilarni aniqlashi mumkin:

• Gormonal holat (gormonlar qalqonsimon bez va buyrak usti bezlari, jinsiy gormonlar);
• Virusli va bakterial infektsiyalarning mavjudligi (OIV, B va C, xlamidiya, sifiliz va, shuningdek, patogen mikroorganizmlar keltirib chiqaradigan boshqa ko'plab kasalliklar);
• Yuqumli jarayonni boshlagan mikroorganizmlarning hayotiy faoliyatining izlari, muvaffaqiyatli yakunlangan va ushbu patogenga immunitet reaktsiyasini shakllantirish bosqichiga o'tgan. Bunday izlar, ya'ni antikorlar ko'p hollarda qonda umrbod aylanib yuradi va shu bilan odamni qayta infektsiyadan himoya qiladi.

Elishayning mohiyati nimada?

Ferment immunoassay usuli nafaqat patogenning mavjudligini (sifat tahlili), balki bemorning qon zardobidagi miqdoriy tarkibini ham aniqlash imkonini beradi.

Virusli yoki bakterial doza yuqumli jarayonning borishi va uning natijalariga sezilarli ta'sir qiladi, shuning uchun miqdoriy tahlil turli shakl va bosqichlarda kasalliklarni tashxislash va davolashda muhim rol o'ynaydi.

Biroq, ferment immunoassay tadqiqotlarini Elishay usuli sifatida bilgan holda, biz sayyoramizda yashovchi mikroorganizmlarning bunday keng doirasini qanday qamrab olishi haqida o'ylamaymiz, ularning aksariyati odamlar va hayvonlarning salomatligi va hayotiga bevosita tahdid soladi. Ammo haqiqat shundaki, Elishayning ko'plab variantlari mavjud (raqobatdosh bo'lmagan va raqobatbardosh - to'g'ridan-to'g'ri va bilvosita), ularning har biri o'z muammosini hal qiladi va shu bilan maqsadli qidiruvga imkon beradi.

Bir yoki boshqa sinfning immunoglobulinlarini aniqlash uchun an'anaviy 96 quduqli polistirol paneli (plastinka) qo'llaniladi, ularning quduqlarida sorblangan rekombinant oqsillar qattiq fazada to'planadi. Qon zardobi bilan quduqqa kiradigan antikorlar yoki antigenlar "tanish" ob'ektni topadilar va u bilan kompleks hosil qiladilar (AG - AT), bu ferment konjugati tomonidan o'rnatilganda quduq rangining o'zgarishi sifatida namoyon bo'ladi. natijalar.

Ferment immunoassay maxsus laboratoriyalarda ishlab chiqarilgan va barcha zarur reaksiyaga kirishuvchi komponentlar bilan jihozlangan ma'lum o'ziga xoslikdagi test tizimlari yordamida amalga oshiriladi. Tadqiqot kir yuvish mashinalari ("yuvish mashinalari") va o'qish spektrofotometrlari yordamida amalga oshirilishi mumkin, bu asosan qo'l mehnatini o'z ichiga oladi. Laboratoriyani monoton instilatsiya, yuvish va boshqa odatiy ishlardan ozod qiladigan to'liq avtomatik mashinalarda, albatta, ishlash tezroq va qulayroqdir, ammo hamma laboratoriyalar ham bunday hashamatni ko'tara olmaydi va eski uslubda ishlashda davom etadi. yarim avtomatik mashinalar.

Elishay natijalarini talqin qilish shifokorning vakolatiga kiradi. laboratoriya diagnostikasi, bu holda, deyarli barcha immunokimyoviy reaktsiyalarning noto'g'ri-musbat yoki noto'g'ri-salbiy javoblarni berish uchun xos xususiyati ham hisobga olinadi.

Video: zamonaviy ferment immunoassay

Elishay sifilis misolida natijalar beradi

Ferment immunoassay barcha shakllarni aniqlash uchun javob beradi, va bundan tashqari, skrining tadqiqotlarida qo'llaniladi. Tahlil qilish uchun bemorning och qoringa olingan venoz qoni ishlatiladi. Ishda ma'lum bir o'ziga xoslik (AB sinflari A, M, G) yoki umumiy antikorlar bo'lgan planshetlar qo'llaniladi.

Sifilisdagi antikorlar ma'lum bir ketma-ketlikda ishlab chiqarilganligini hisobga olsak, Elishay infektsiya qachon sodir bo'lganligi va jarayonning qaysi bosqichida ekanligi haqidagi savolga osongina javob berishi mumkin va olingan natijalarning talqini quyidagi shaklda taqdim etilishi mumkin:

• IgM yuqumli jarayonning davomiyligini ko'rsatadi (surunkali yallig'lanish kasalliklarining kuchayishi paytida paydo bo'lishi mumkin);
• IgA infektsiyaning bir oydan ko'proq vaqt oldin sodir bo'lganligini ta'kidlaydi;
• IgG infektsiyaning avj olganligini yoki yaqinda davolash boshlanganligini ko'rsatadi, bu esa anamnezni olish orqali osongina aniqlanadi.

Sifilis uchun test o'tkazilganda, salbiy quduqlar (va salbiy nazorat) rangsiz bo'lib qoladi, musbat quduqlar (va musbat nazorat) sinov paytida qo'shilgan xromogenning rangi o'zgarishi sababli yorqin sariq rangga ega bo'ladi. Biroq, rang intensivligi har doim ham nazorat bilan mos kelmaydi, ya'ni u biroz oqargan yoki biroz sarg'ish bo'lishi mumkin. Bu shubhali natijalar, ular bilan, qoida tariqasida, takroriy tadqiqotlar o'tkaziladi majburiy buxgalteriya hisobi spektrofotometrda olingan miqdoriy ko'rsatkichlar, lekin umuman olganda, rang immun komplekslari soniga to'g'ridan-to'g'ri proportsionaldir (ags va antikorlar o'zaro bog'langan).

Ferment immunoassaylarining eng hayajonlisi OIV Elishay hisoblanadi

Buni tahlil qilish, ehtimol, aholining keng doirasi uchun boshqalardan ko'ra qiziqroqdir, chunki ko'pchilik g'oyib bo'lganligini aniq aytish mumkin emas. ijtimoiy muammolar(fohishalik, giyohvandlik va boshqalar). Afsuski, OIV nafaqat insoniyat jamiyatining ushbu qatlamlariga ta'sir qiladi, siz jinsiy axloqsizlik yoki giyohvand moddalarni iste'mol qilish bilan bog'liq bo'lmagan turli xil sharoitlarda yuqishingiz mumkin. Ammo agar OIV testini o'tkazish zarurati tug'ilsa, sizning atrofingizdagi har bir kishi bunday laboratoriyaga tashrifingiz haqida bilishidan qo'rqmasligingiz kerak. Endi OIV bilan kasallanganlar qonun bilan himoyalangan va shubhasi bo'lganlar anonim idoralarga murojaat qilishlari mumkin, u erda ular muammoni oshkoralik va qoralashdan qo'rqmasdan hal qilishlari mumkin.

Diagnostika uchun ferment immunoassay usuli qo'llaniladi OIV infektsiyasi, eng yuqori standart tadqiqotga ishora qiladi, ammo bu maxsus shartlarni talab qiladi, chunki mavzu juda nozik.

Jinsiy aloqa, qon quyish, infektsiyani ko'rsatadigan boshqa tibbiy muolajalardan so'ng va inkubatsiya davrining oxirida ("seronegativ oyna") OIV Elishayni o'tkazish mantiqiy, ammo shuni yodda tutish kerakki, bu vaqt oralig'i doimiy emas. 14-30 kun ichida tugashi mumkin yoki olti oygacha davom etishi mumkin, shuning uchun o'rtacha qiymat 45 dan 90 kungacha bo'lgan oraliq hisoblanadi. Yoniq OIV qoni Ular boshqa infektsiyalar bilan bir xil tarzda beriladi - och qoringa venadan. Natijalar laboratoriyada material to'planishiga va uning ish yukiga (2 kundan 10 kungacha) qarab tayyor bo'ladi, garchi ko'pincha laboratoriyalar o'sha kuni yoki keyingi kuni javob beradi.

Sizning OIV natijalaridan nimani kutishingiz mumkin?

OIV infektsiyasi uchun ELISA virusning ikki turiga antikorlarni aniqlaydi: OIV-1 (Rossiyada, Evropa va Osiyoning boshqa mamlakatlarida keng tarqalgan) va OIV-2 (G'arbiy Afrikada ko'proq).

OIV Elishayning vazifasi barcha test tizimlarida aniqlangan, ammo keyingi davrda G sinfidagi antikorlarni va yangi avlod rekombinant test to'plamlarida aniqlangan A va M sinfidagi antikorlarni izlashdan iborat bo'lib, ular antikorlarni topishga imkon beradi. eng dastlabki bosqichlarda ( inkubatsiya davri- "seronegativ oyna"). Elishaydan quyidagi javoblarni kutishingiz mumkin:

1. Birlamchi ijobiy natija: qonni bir xil turdagi test tizimi bilan qayta tekshirish kerak, lekin iloji bo'lsa, boshqa seriyali va boshqa shaxs (laborant);
2. Takroriy (+) birlamchi tahlilga o'xshash tekshiruvi bilan bemordan yangi qon olishni o'z ichiga oladi;
3. Yana bir ijobiy natija yuqori aniqlikdagi test to'plamlaridan (2-3 dona) foydalaniladigan ma'lumotnoma tahlilidan o'tkaziladi;
4. Ikkala (yoki uchta) tizimda ijobiy natija immunoblottingga yuboriladi (xuddi shu Elishay, lekin amalga oshiriladi alohida ayniqsa yuqori o'ziga xoslikdagi test to'plamlari uchun).

OIV infektsiyasi to'g'risida xulosa faqat immunoblotting asosida amalga oshiriladi. Yuqtirilgan odam bilan suhbat to'liq maxfiylikda o'tkaziladi. Rossiyada ham, boshqa mamlakatlarda ham tibbiy sirlarni oshkor qilish jinoiy jazoga tortiladi.

Ferment immunoassay usulidan foydalangan holda xlamidiya va sitomegalovirus uchun testlar ham ayniqsa mashhur bo'ldi, chunki ular infektsiya vaqtini, kasallikning bosqichini va davolash choralarining samaradorligini aniqlashga imkon beradi.

Amalga oshirish jarayonida turli sinflardagi antikorlarning paydo bo'lishini ham kuzatish mumkin. turli bosqichlarda patologik holat Yuqumli vosita sabab bo'lgan:

• IgM infektsiyadan keyin etti kun o'tgach aniqlanishi mumkin;
• IgA infektsiyaning tanada bir oydan ortiq yashayotganligini ko'rsatadi;
• IgG xlamidiya tashxisini tasdiqlaydi va davolanishni kuzatish va uning samaradorligini aniqlashga yordam beradi. Shuni ta'kidlash kerakki, G sinfidagi antikorlar kasallik davomiyligidan qat'i nazar tanada qoladi va aylanib yuradi, shuning uchun tahlilni to'g'ri talqin qilish uchun, aytmoqchi, mos yozuvlar qiymatlarini (normalarni) hisobga olish kerak. , har bir CDL uchun farqlanadi: sinov tizimining markasini va to'plamga kiritilgan reaktivlarning o'ziga xosligini hisobga olgan holda. Oddiy qiymatlar Elishay natijasi yonidagi shaklga kiritiladi.

ga kelsak, bu erda u biroz boshqacha: M sinfidagi antikorlar taxminan bir oydan bir yarim oygacha keyin paydo bo'ladi, ya'ni ijobiy natija (IgM+) birlamchi infektsiya bosqichida yoki yashirin infektsiyaning qayta faollashishi paytida bo'ladi va 4 oydan olti oygacha saqlanib qoladi.

G AT sinfining mavjudligi birlamchi boshlanishiga xosdir o'tkir infektsiya yoki qayta infektsiya. Tahlil virus mavjudligini bildiradi, ammo yuqumli jarayon qaysi bosqichda ekanligi haqida ma'lumot bermaydi. Shu bilan birga, normal IgG titrini aniqlash ham qiyinchiliklarga olib keladi, chunki bu butunlay ma'lum bir odamning immunitetiga bog'liq, ammo bu G sinfidagi immunoglobulinlarni aniqlash orqali aniqlanadi, CMV tashxisini qo'yishda antikorlarning bunday xatti-harakati hisobga olinadi G sinfidagi antikorlarning CMV bilan o'zaro ta'sir qilish qobiliyatini baholash, keyinchalik uni "neytrallashtirish" (AT avidligi). Yoniq dastlabki bosqich IgG kasalliklari virusli antijenler bilan juda yomon bog'lanadi (past avidlik) va shundan keyingina faollikni namoyon qila boshlaydi, shuning uchun biz antikorlarning avidligi oshishi haqida gapirishimiz mumkin.

Biz ferment immunoassayning afzalliklari haqida ko'p gapirishimiz mumkin, chunki bu usul faqat venoz qon yordamida ko'plab diagnostika muammolarini hal qilishga muvaffaq bo'ldi. Tadqiqot uchun material to'plashda uzoq kutish, tashvish va muammolarga hojat yo'q. Bundan tashqari, Elishay test tizimlarini takomillashtirish davom etmoqda va test 100% ishonchli natija beradigan kun uzoq emas.

Video: Moskva davlat tibbiyot universitetining o'quv filmi. Sechenov Elishay asoslari bo'yicha

Inson immunitet tanqisligi virusi (OIV) infektsiyasiga javoban tanada paydo bo'ladigan antikorlar. OIV p24 antijeni va 1 va 2 turdagi OIV antijenlariga antikorlarni sifatli aniqlash.

Funksiyalar. Odamning immunitet tanqisligi virusi (OIV) retroviruslar oilasiga kiradi. Virus birinchi navbatda immunitet tizimining hujayralarini - T-limfotsitlarni yuqtiradi. Xost (inson) hujayrasida virus DNKning bir qismini hosil qiladi va uni xost genomiga birlashtiradi. Virus bilan kasallangan hujayra virus zarralarini qurish uchun materiallar ishlab chiqaradi va uning yuzasida virus antijenlari paydo bo'ladi. Qiz hujayralar bo'linganda, ular virusli DNKni oladi. Antikorlar hujayralar yuzasida joylashgan virus antijenlariga ishlab chiqariladi, ular infektsiyani tashxislash uchun ishlatiladi. OIVga qarshi antikorlar infektsiyalangan odamning qonida aniqlana boshlaydi, odatda 3 - 6 haftadan so'ng, deyarli har doim 12 haftadan so'ng aniqlanadi, kamdan-kam hollarda ular virus qonga kirgandan keyin bir necha oy yoki undan ko'proq vaqt o'tgach paydo bo'ladi kasallikning terminal davrida sezilarli darajada kamayishi mumkin. OIV infektsiyasining kamdan-kam hollarda antikorlar uzoq vaqt davomida yo'qolishi mumkin.

INFEKTSION xususiyatlari. INFEKTSION.

OIV infektsiyasini yuqtirish ehtimoli jinsiy a'zolar / og'iz / to'g'ri ichak shilliq qavatining jinsiy yo'l bilan o'tishi, tanaga kiradigan virus zarralari soni, immunitet tizimining holati, umumiy holat tanasi. Virusli zarralarning katta oqimi bilan infektsiyaning klinik belgilari oldinroq paydo bo'ladi. OIV I bilan kasallanganda kasallikning birinchi belgilari OIV II ga qaraganda tezroq namoyon bo'ladi.

Tayyorgarlik

Tadqiqot uchun maxsus tayyorgarlik talab qilinmaydi.

Sinov vaqti virusning mumkin bo'lgan uzatilishi bilan belgilanadi: infektsiya qanchalik ko'p bo'lsa (jadvalga qarang), o'rganish tezroq ma'lumotga ega bo'ladi. Mumkin bo'lgan infektsiyadan keyin 3-4 haftadan kechiktirmay OIVga antikorlarni aniqlash uchun test o'tkazish tavsiya etiladi, agar salbiy natija bo'lsa, 3 va 6 oydan keyin takroriy test o'tkaziladi.

Ko'rsatkichlar

• Ikki dan ortiq sohada kattalashgan limfa tugunlari.
• Leykopeniya bilan limfopeniya.
• Kechasi terlar.
• Noma'lum sabablarga ko'ra to'satdan vazn yo'qotish.
• Noma'lum sabablarga ko'ra uch haftadan ortiq diareya.
• Noma'lum sabablarga ko'ra isitma.
• Homiladorlikni rejalashtirish.
• Operatsiyadan oldingi tayyorgarlik, kasalxonaga yotqizish.
• Quyidagi infektsiyalarni yoki ularning kombinatsiyalarini aniqlash: sil, manifest toksoplazmoz, tez-tez takrorlanuvchi herpesvirus infektsiyasi, ichki organlarning kandidozi, takroriy gerpes zoster nevralgiyasi, mikoplazmalar, pnevmokistlar yoki legionellalar keltirib chiqaradigan pnevmoniya.
• Yoshligida Kaposi sarkomasi.
• Tasodifiy jinsiy aloqalar.

Natijalarni talqin qilish

INVITRO laboratoriyasida o'lchov birliklari: OIVga qarshi antikor testining 1/2 qismi sifatli hisoblanadi. Agar antikorlar bo'lmasa, javob "salbiy" bo'ladi. OIVga qarshi antikorlar aniqlansa, test boshqa seriyada takrorlanadi. Agar ferment bilan bog'langan immunosorbent testida ijobiy natija takrorlansa, namuna OIV diagnostikasida "oltin standart" bo'lgan tasdiqlovchi immunoblot usuli yordamida tekshirishga yuboriladi.

Malumot qiymatlari: salbiy.

Ijobiy natija:

1. OIV infektsiyasi;
2. noto'g'ri ijobiy natija (Epstein-Barr virusiga antikorlar, revmatoid omil, asosiy gistokompozitsiya kompleksi HLA);
3. tadqiqot informatsion emas (18 oygacha OIV bilan kasallangan onalardan tug'ilgan bolalarda)

Salbiy natija:

1. infektsiyalanmagan (tahlil qilish uchun diagnostika muddatlari bajarilgan);
2. infektsiyaning seronegativ versiyasi (antikorlar kech ishlab chiqariladi);
3. OITSning terminal bosqichi (OIVga qarshi antikorlarning shakllanishi buzilgan);
4. tadqiqot informatsion emas (diagnostika muddatlari bajarilmagan).

Diqqat qilish! haqida ma'lumot ijobiy natijalar parenteral virusli gepatit belgilari uchun serologik tadqiqotlar va OIVga antikorlarni aniqlash.

Hurmatli bemorlar, hududdagi amaldagi qoidalarga muvofiq Rossiya Federatsiyasi qoidalar:

- parenteral virusli gepatit belgilari bo'yicha serologik testlarning ijobiy natijalari to'g'risidagi ma'lumotlar INVITRO laboratoriyasi tomonidan Moskva shahridagi Davlat sanitariya-epidemiologiya nazorati markazining yuqumli kasalliklarni hisobga olish va ro'yxatga olish bo'limiga uzatiladi. Moskvadagi ORUIB TsGSEN, o'z navbatida, ambulator yordam ko'rsatadigan tibbiy muassasaga ma'lumot olib keladi. tibbiy yordam

bemorni ro'yxatga olish joyida;

- OIVga qarshi antikorlarni aniqlashning ijobiy natijalari to'g'risida ma'lumot - OITS markaziga. "INVITRO mustaqil laboratoriyasi" MChJda tadqiqot o'tkazish uchun arizalar pasport yoki uning o'rnini bosuvchi hujjat yordamida to'ldiriladi. Pasport (uning o'rnini bosuvchi hujjat) bo'lmasa, bemor berish huquqiga ega

biomaterialni topshirish uchun anonim ariza.

Hozirgi vaqtda yangi diagnostika texnologiyalari ko'plab kasalliklarning etiologik va patogenetik sabablarini aniqlashga imkon beradi va davolash natijalariga tubdan ta'sir qiladi. Ehtimol, ushbu texnologiyalarni klinik amaliyotga joriy etishning eng ta'sirchan natijalari immunologiya va yuqumli kasalliklar diagnostikasi sohasida erishilgandir.

Ferment bilan bog'langan immunosorbent va xemiluminesans immunoassaylarga asoslangan test tizimlari turli sinflardagi antikorlarni aniqlay oladi, bu yuqumli kasalliklarni tashxislash uchun klinik va analitik sezgirlik va o'ziga xoslik usullarining ma'lumotlar mazmunini sezilarli darajada oshiradi. Shuni ta'kidlash kerakki, infektsiyalarni tashxislashda eng muhim yutuqlar laboratoriya amaliyotiga polimeraza zanjiri reaktsiyasi usulini joriy etish bilan bog'liq bo'lib, u bir qator yuqumli kasalliklarni tashxislash va davolash samaradorligini baholashda "oltin standart" hisoblanadi. kasalliklar.

Tadqiqot uchun turli xil biologik materiallardan foydalanish mumkin: sarum, qon plazmasi, qirib tashlash, biopsiya, plevra yoki miya omurilik suyuqligi (CSF). Avvalo, infektsiyalarni laboratoriya diagnostikasi usullari virusli gepatit B, C, D, sitomegalovirus infektsiyasi, jinsiy yo'l bilan yuqadigan infektsiyalar (gonoreya, xlamidiya, mikoplazma, ureaplazma), sil, OIV infektsiyasi va boshqalar kabi kasalliklarni aniqlashga qaratilgan.

OIV infektsiyasi - bu odamning immunitet tanqisligi virusi (OIV) tomonidan qo'zg'atilgan kasallik bo'lib, u limfotsitlar, makrofaglar va asab to'qimalari hujayralarida uzoq vaqt saqlanib, immunitet va immunitetning asta-sekin progressiv shikastlanishiga olib keladi. asab tizimlari ikkilamchi infektsiyalar, o'smalar, subakut ensefalit va boshqa patologik o'zgarishlar bilan namoyon bo'lgan tananing.

INFEKTSION qo'zg'atuvchisi - 1 va 2 turdagi inson immunitet tanqisligi viruslari (OIV-1, OIV-2) - retroviruslar oilasiga, sekin viruslar kenja turkumiga kiradi. Virionlar diametri 100-140 nm bo'lgan sharsimon zarralardir. Virusli zarracha tashqi fosfolipid konvertga ega bo'lib, u kilodaltonlarda o'lchanadigan ma'lum molekulyar og'irlikka ega bo'lgan glikoproteinlarni (strukturali oqsillarni) o'z ichiga oladi. OIV-1da bular gpl60, gpl20, gp41. Yadroni qoplaydigan virusning ichki qobig'i, shuningdek, ma'lum molekulyar og'irligi bo'lgan oqsillar bilan ifodalanadi - p17, p24, p55 (OIV-2 gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55 o'z ichiga oladi).

OIV genomida RNK va teskari transkriptaza (revertaza) fermenti mavjud. Retrovirus genomining xost hujayra genomi bilan bog‘lanishi uchun avval DNK teskari usul yordamida virusli RNK shablonida sintezlanadi. Keyin proviral DNK mezbon hujayraning genomiga integratsiya qilinadi. OIV aniq antijenik o'zgaruvchanlikka ega, bu gripp virusidan sezilarli darajada oshadi.

Inson tanasida OIVning asosiy maqsadi T-limfotsitlar bo'lib, ular yuzasida eng ko'p CD4 retseptorlarini olib yuradi. OIV hujayraga teskari yo'l bilan kirgandan so'ng, virus o'zining RNK namunasi asosida DNKni sintez qiladi, u mezbon hujayraning genetik apparatiga (CD4 limfotsitlari) integratsiya qilinadi va u erda provirus holatida umr bo'yi qoladi. T-limfotsit yordamchilaridan tashqari, makrofaglar, B-limfotsitlar, neyroglial hujayralar, ichak shilliq qavati va boshqa ba'zi hujayralar ta'sirlanadi. T-limfotsitlar (CD4 hujayralari) sonining kamayishi sababi nafaqat virusning bevosita sitopatik ta'siri, balki ularning infektsiyalanmagan hujayralar bilan birlashishi hamdir. T-limfotsitlarning shikastlanishi bilan bir qatorda, OIV infektsiyasi bilan og'rigan bemorlarda B-limfotsitlarning poliklonal faollashuvi barcha sinflarning immunoglobulinlari, ayniqsa IgG va IgA sintezining oshishi va keyinchalik immunitet tizimining ushbu qismining kamayishi kuzatiladi. Immunitet jarayonlarining disregulyatsiyasi a-interferon, b2-mikroglobulin darajasining oshishi va IL-2 darajasining pasayishi bilan ham namoyon bo'ladi. Immunitet tizimining disfunktsiyasi natijasida, ayniqsa T-limfotsitlar (CD4) soni 1 mkl yoki undan kam qonda 400 hujayragacha kamayganda, turli xil viruslarda virionlar sonining sezilarli darajada ko'payishi bilan OIVning nazoratsiz replikatsiyasi uchun sharoitlar paydo bo'ladi. tananing muhitlari. Immunitet tizimining ko'p qismlarining shikastlanishi natijasida OIV bilan kasallangan odam turli infektsiyalarning patogenlariga qarshi himoyasiz bo'lib qoladi.

Immunosupressiyaning kuchayishi fonida, normal faoliyat ko'rsatadigan odamda yuzaga kelmaydigan og'ir progressiv kasalliklar rivojlanadi. immun tizimi. Bular Jahon sog'liqni saqlash tashkiloti (VOZ) tomonidan OITSni belgilovchi yoki OITSni aniqlovchi kasalliklar deb ta'riflagan kasalliklardir.

OITSni aniqlovchi kasalliklar

Birinchi guruh - faqat og'ir immunitet tanqisligiga xos bo'lgan kasalliklar (CD4 darajasi<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.

Ikkinchi guruh - bu og'ir immunitet tanqisligi fonida ham, ba'zi hollarda usiz ham rivojlanishi mumkin bo'lgan kasalliklar.

Shuning uchun bunday hollarda tashxisni laboratoriya tasdiqlashi kerak.

Birinchi guruh:

• qizilo'ngach, traxeya, bronxlar kandidozi;
• ekstrapulmoner kriptokokkoz;
• 1 oydan ortiq diareya bilan kechadigan kriptosporidioz;
• 1 oydan oshgan bemorda jigar, taloq yoki limfa tugunlaridan tashqari turli organlarning sitomegalovirusli lezyonlari;
• 1 oydan ortiq davom etadigan teri va shilliq qavatdagi yaralar, shuningdek, 1 oydan oshgan bemorga ta'sir qiladigan har qanday davomiy bronxit, pnevmoniya yoki ezofagit bilan namoyon bo'lgan herpes simplex virusi keltirib chiqaradigan infektsiya;
• 60 yoshgacha bo'lgan bemorlarda umumiy Kaposi sarkomasi;
• 60 yoshgacha bo'lgan bemorlarda miya limfomasi (birlamchi);
• 12 yoshgacha bo'lgan bolalarda limfotsitar interstitsial pnevmoniya va / yoki o'pka limfoid displazi;
• terida, bachadon bo'yni limfa tugunlarida, o'pka ildizlarining limfa tugunlarida o'pkadan tashqari lokalizatsiya yoki lokalizatsiya (o'pkadan tashqari) bilan atipik mikobakteriyalar (M. aviumintracellulare kompleksining mikobakteriyalari) keltirib chiqaradigan tarqalgan infektsiya;
• Pnevmokist pnevmoniyasi;
• progressiv multifokal leykoensefalopatiya;
• 1 oydan oshgan bemorlarda miya toksoplazmozi.

Ikkinchi guruh:

• 13 yoshgacha bo'lgan bolalarda qo'shma yoki takroriy bakterial infektsiyalar (2 yildan ortiq kuzatilgan ikki holatdan ortiq): sepsis, pnevmoniya, meningit, suyak yoki bo'g'imlarning shikastlanishi, Haemophilus influenzae, streptokokklar keltirib chiqaradigan xo'ppozlar;
• tarqalgan koksidioidomikoz (o'pkadan tashqari lokalizatsiya);
• OIV ensefalopatiyasi (OIV demensiyasi, OITS demensiyasi);
• 1 oydan ortiq davom etadigan diareya bilan gistoplazmoz;
• 1 oydan ortiq davom etadigan diareya bilan izosporoz;
• Har qanday yoshdagi Kaposi sarkomasi;
• har qanday yoshdagi odamlarda miya limfomasi (birlamchi);
• boshqa B hujayrali limfomalar (Xodgkin kasalligidan tashqari) yoki noma'lum immunofenotipli limfomalar: kichik hujayrali limfomalar (masalan, Burkitt limfomasi va boshqalar); immunoblastik sarkomalar (immunoblastik, yirik hujayrali, diffuz gistiyositik, diffuz differensiallanmagan limfomalar);
• o'pkadan tashqari teri, bachadon bo'yni yoki hilar limfa tugunlarining shikastlanishi bilan tarqalgan mikobakterioz (sil emas);
• ekstrapulmoner sil kasalligi (o'pkadan tashqari ichki organlarga ta'sir qilish);
• Salmonella septisemiyasi, takroriy;
• OIV distrofiyasi (ozlanish, to'satdan vazn yo'qotish).

1-jadvalda (yuqoridagi manba havolasiga qarang) OITSni aniqlovchi kasalliklar va ularning etiologik omillari keltirilgan.

OITSning ko'plab tasniflari mavjud.

AQSh Kasalliklarni nazorat qilish markazi tomonidan taklif qilingan yangi tasnifga ko'ra (2-jadval - yuqoridagi manbaga havolaga qarang), OITS diagnostikasi CD4 limfotsitlar soni 200/mkl dan kam bo'lgan odamlar uchun ham belgilanadi. OITSni aniqlaydigan kasalliklarning yo'qligi.

B toifasi turli sindromlarni o'z ichiga oladi, ulardan eng muhimi basillyar angiomatoz, orofaringeal kandidoz, qaytalanuvchi vulvovaginal kandidoz, davolash qiyin, bachadon bo'yni displazi, bachadon bo'yni karsinomasi, idiopatik trombotsitopenik purpura, listerioz, periferik.

Qonda OIV-1 va OIV-2 ga antikorlar

Qon zardobida OIV-1 va OIV-2 ga antikorlar odatda yo'q.

OIVga qarshi antikorlarni aniqlash OIV infektsiyasining laboratoriya diagnostikasining asosiy usuli hisoblanadi. Usul fermentga bog'langan immunosorbent tahliliga (ELISA) asoslangan - sezuvchanlik 99,5% dan ortiq, o'ziga xoslik 99,8% dan ortiq. OIVga qarshi antikorlar yuqtirgan odamlarning 90-95 foizida infektsiyadan keyin 1 oy ichida, 5-9 foizida - 6 oydan keyin, 0,5-1 foizda - keyinroq paydo bo'ladi. OITS bosqichida antikorlar soni butunlay yo'qolguncha kamayishi mumkin.

Tadqiqot natijasi sifat jihatidan ifodalanadi: ijobiy yoki salbiy.

Salbiy test natijasi qon zardobida OIV-1 va OIV-2 ga antikorlarning yo'qligini ko'rsatadi. Laboratoriya tayyor bo'lgach, darhol salbiy natija beradi. Agar ijobiy natija olinsa - OIVga antikorlarni aniqlash - laboratoriyada noto'g'ri ijobiy natijalarga yo'l qo'ymaslik uchun tahlil yana 2 marta takrorlanadi.

Qon zardobida OIV virusi oqsillariga antikorlar uchun immunoblotting

Qon zardobida OIV virusi oqsillariga antikorlar odatda yo'q.

OIVga antikorlarni aniqlash uchun Elishay usuli skrining usuli hisoblanadi. Ijobiy natijaga erishilganda, uning o'ziga xosligini tasdiqlash uchun immunoblotting usuli qo'llaniladi - Western-blot - bemorning qon zardobidagi turli virusli oqsillar bilan antikorlar jelida qarshi cho'kma, elektroforez yordamida molekulyar og'irlik bo'yicha ajratilgan va qo'llaniladi. nitrotsellyulozaga. Virusli oqsillarga gp41, gpl20, gpl60, p24, pi8, p17 va boshqalarga antikorlar aniqlanadi.

Rossiya OITSning oldini olish va nazorat qilish markazining tavsiyalariga ko'ra, gp41, gpl20, gpl60 glikoproteinlaridan biriga antikorlarning aniqlanishi ijobiy natija deb hisoblanishi kerak. Agar boshqa virusli oqsillarga antikorlar aniqlansa, natija shubhali hisoblanadi, bunday bemorni ikki marta - 3 va 6 oydan keyin tekshirish kerak.

Maxsus OIV oqsillariga antikorlarning yo'qligi ferment immunoassay usuli noto'g'ri ijobiy natija berganligini anglatadi. Shu bilan birga, amaliy ishda, immunoblotting usuli natijalarini baholashda, kompaniya tomonidan ishlatiladigan "Immunoblotting to'plami" ga taqdim etilgan ko'rsatmalarga amal qilish kerak.

OIV infektsiyasini laboratoriya diagnostikasi uchun immunoblotting usuli qo'llaniladi.

Qon zardobida p24 antijeni

Qon zardobida p24 antijeni odatda yo'q.

p24 antijeni OIV nukleotidining devor oqsilidir. OIV infektsiyasidan keyin birlamchi namoyon bo'lish bosqichi replikativ jarayonning boshlanishi oqibatidir. p24 antijeni infektsiyadan 2 hafta o'tgach qonda paydo bo'ladi va 2 dan 8 haftagacha bo'lgan davrda Elishay tomonidan aniqlanishi mumkin. INFEKTSION paytidan boshlab 2 oy o'tgach, p24 antijeni qondan yo'qoladi. Keyinchalik, OIV infektsiyasining klinik kursida qonda p24 oqsili darajasining ikkinchi o'sishi kuzatiladi. OITSning shakllanishi davrida tushadi. P24 antijenini aniqlash uchun mavjud Elishay test tizimlari donorlar va bolalarda OIVni erta aniqlash, OITS kursining prognozini aniqlash va OITS bilan kasallangan bemorlarda terapiyani kuzatish uchun ishlatiladi. Elishay yuqori analitik sezuvchanlikka ega, bu qon zardobida OIV-1 p24 antijenini 5-10 pkg/ml konsentratsiyada va OIV-2 - 0,5 ng/ml dan kam va o'ziga xoslikni aniqlash imkonini beradi. Ammo shuni ta'kidlash kerakki, qondagi p24 antijeni darajasi individual o'zgarishlarga duch keladi, ya'ni infektsiyadan keyingi dastlabki davrda bemorlarning atigi 20-30 foizi ushbu test yordamida aniqlanishi mumkin (Rose N.R. va boshq., 1997).

IgM va IgG sinflarining p24 antijeniga antikorlar qonda 2-haftadan boshlab paydo bo'ladi, 2-4 hafta ichida eng yuqori darajaga etadi va turli vaqtlarda shu darajada qoladi: IgM sinfidagi antikorlar - bir necha oy davomida, keyin bir yil ichida yo'qoladi. infektsiya va IgG antikorlari yillar davomida saqlanib qolishi mumkin.

OIV infektsiyasini tashxislash algoritmi kasallikning bosqichiga bog'liq va turli sinflarning antikorlarini aniqlash dinamikasidagi o'zgarishlar bilan tavsiflanadi (1-rasm, 2 - yuqoridagi manbaga havolaga qarang).

Tadqiqot natijasi sifat jihatidan ifodalanadi - ijobiy yoki salbiy. Salbiy test natijasi qon zardobida OIV-1 va OIV-2 va p24 antijeniga antikorlarning yo'qligini ko'rsatadi.

Laboratoriya tayyor bo'lgach, darhol salbiy natija beradi. Agar ijobiy natija olinsa - OIV-1 va OIV-2 va/yoki p24 antijeniga antikorlarni aniqlash - laboratoriyada noto'g'ri ijobiy natijalarga yo'l qo'ymaslik uchun tahlil yana 2 marta takrorlanadi.

Tadqiqot natijalaridan qat'i nazar, bemorning qon namunasi va 3 ta tadqiqot natijalari laboratoriya tomonidan ijobiy natijani tasdiqlash yoki noaniq natijani tekshirish uchun viloyat OITS markaziga yuboriladi. Bunday hollarda ushbu tadqiqot bo'yicha yakuniy javob viloyat OITSga qarshi kurash markazi tomonidan beriladi.

Polimeraza zanjiri reaktsiyasi orqali OIVni aniqlash (sifat)

Polimeraza zanjiri reaktsiyasi orqali OIVni aniqlash - PCR (sifat) quyidagi maqsadlarda amalga oshiriladi:

• shubhali immunoblotting natijalarini hal qilish;
• OIV infektsiyasini erta tashxislash uchun;
• antiviral davolash samaradorligini kuzatish;
• OITS bosqichini aniqlash (infektsiyaning kasallikka o'tishi).

Birlamchi OIV infektsiyasi paytida PCR usuli infektsiyadan 10-14 kun o'tgach qonda OIV RNKni aniqlashi mumkin.

Tadqiqot natijasi sifat jihatidan ifodalanadi: ijobiy yoki salbiy. Salbiy test natijasi qonda OIV RNK yo'qligini ko'rsatadi.

Ijobiy natija - OIV RNKni aniqlash - bemorning infektsiyalanganligini ko'rsatadi.

Polimeraza zanjiri reaktsiyasi orqali OIVni aniqlash (miqdoriy)

Qonda OIV odatda yo'q.

PCR yordamida OIV RNKning to'g'ridan-to'g'ri miqdorini aniqlash CD4 hujayralari sonini aniqlashdan ko'ra OIV bilan kasallangan odamlarda OITSning rivojlanish tezligini aniqroq taxmin qilish va shuning uchun ularning omon qolishini aniqroq baholash imkonini beradi. Virusli zarrachalarning yuqori darajasi odatda jiddiy immunitet tanqisligi va CD4 hujayralari sonining pastligi bilan bog'liq. Virusli zarrachalarning past darajalari odatda yaxshi immunitet holati va CD4 hujayralari sonining yuqoriligi bilan bog'liq. Qondagi virusli RNKning tarkibi kasallikning klinik bosqichga o'tishini taxmin qilish imkonini beradi. OIV RNK-1 darajasi >74,100 nusxa/ml bo'lsa, deyarli barcha bemorlar rivojlanadi klinik rasm OITS (Senior D., Holden E., 1996).

Qonda OIV-1 darajasi 10 000 nusxa/ml dan yuqori bo'lgan odamlarda OITS bilan kasallanish ehtimoli qonda OIV-1 darajasiga ega bo'lgan odamlarga qaraganda 10,8 baravar yuqori.<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.

Bir guruh amerikalik mutaxassislar OIV bilan kasallangan bemorlarni davolash uchun ko'rsatmalar ishlab chiqdilar. Davolash qonda CD4 hujayralari soni past bo'lgan bemorlarga ko'rsatiladi<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20 000 nusxa/ml (PCR). OIV bilan kasallangan odamlarda antiretrovirus terapiya natijalari sarum OIV RNK darajasini pasaytirish orqali baholanadi.

Samarali davolash bilan viremiya darajasi dastlabki 8 hafta ichida 10 baravar kamayishi va usul sezgirligi chegarasidan past bo'lishi kerak (PCR) (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.

Shunday qilib, bugungi kunda boshqa barcha virusli infektsiyalar kabi OIV infektsiyasini tashxislash uchun ko'plab tadqiqot usullari joriy etilgan va klinik amaliyotda qo'llanilgan. Ular orasida serologik tadqiqotlar etakchi o'rinni egallaydi. OIV infektsiyasini tashxislashning asosiy usullari 3-jadvalda keltirilgan (yuqoridagi manba havolasiga qarang), ular viruslarni aniqlashning har bir usulining ahamiyatiga qarab to'rt darajaga bo'lingan:

• A - tashxisni tasdiqlash uchun odatda test qo'llaniladi;
• B - test muayyan holatlarda infektsiyaning muayyan shakllarini tashxislash uchun foydalidir;
• C - test kamdan-kam hollarda diagnostika maqsadida qo'llaniladi, ammo epidemiologik tekshiruvlar uchun katta ahamiyatga ega;
• D testi odatda laboratoriyalar tomonidan diagnostika maqsadida ishlatilmaydi.

Virusli infektsiyalarni tashxislash uchun optimal tahlil usulini tanlashdan tashqari, tadqiqot uchun biomaterialni to'g'ri aniqlash va to'plash bir xil darajada muhim bo'lganligi sababli, 4-jadvalda (yuqoridagi manbaga havolaga qarang) o'rganish uchun optimal biomaterialni tanlash bo'yicha tavsiyalar berilgan. OIV infektsiyasi.

OIV bilan kasallangan odamlarni kuzatish uchun immunitet holatini har tomonlama o'rganish imkoniyatlaridan foydalanish kerak - uning barcha bo'g'inlarini miqdoriy va funktsional aniqlash: gumoral, hujayrali immunitet va umuman nonspesifik qarshilik.

Zamonaviy laboratoriya sharoitida immunologik holatni baholashning ko'p bosqichli printsipi limfotsitlar va qon immunoglobulinlarining subpopulyatsiyasini aniqlashni o'z ichiga oladi. Ko'rsatkichlarni baholashda shuni hisobga olish kerakki, OIV infektsiyasi CD4/CD8 T-hujayra nisbatining 1 dan kam pasayishi bilan tavsiflanadi. 1,5-2,5 CD4/CD8 indeksi normargik holatni, 2,5 dan ortiq bo'lganligini ko'rsatadi. giperaktivlik, kamroq 1,0 - immunitet tanqisligini ko'rsatadi. Shuningdek, yallig'lanish jarayonining og'ir holatlarida CD4/CD8 nisbati 1 dan kam bo'lishi mumkin.

Ushbu nisbat OITS bilan kasallangan bemorlarning immunitet tizimini baholashda muhim ahamiyatga ega, chunki OIV CD4 limfotsitlarini tanlab infektsiyalaydi va yo'q qiladi, buning natijasida CD4 / CD8 nisbati 1 dan sezilarli darajada kamayadi.

Immunologik holatni baholash, shuningdek, hujayra va gumoral immunitet tizimidagi umumiy yoki "yalpi" nuqsonlarni aniqlashga asoslanadi: gipergammaglobulinemiya (IgA, IgM, IgG kontsentratsiyasining oshishi) yoki terminal bosqichida gipogammaglobulinemiya; aylanma immun komplekslarining kontsentratsiyasining ortishi; sitokinlar ishlab chiqarishning pasayishi; limfotsitlarning antijenler va mitogenlarga bo'lgan javobining zaiflashishi.

B-limfotsitlarning umumiy hovuzidagi populyatsiyalar nisbatining buzilishi gumoral immunitetning etishmovchiligiga xosdir. Biroq, bu o'zgarishlar OIV infektsiyasiga xos emas va boshqa kasalliklarda paydo bo'lishi mumkin. Bir qator boshqa laboratoriya ko'rsatkichlarini har tomonlama baholashda shuni hisobga olish kerakki, OIV infektsiyasi ham xarakterlanadi: anemiya, limfo- va leykopeniya, trombotsitopeniya, b2-mikroglobulin va C-reaktiv oqsil darajasining oshishi, transaminaza faolligining oshishi. qon zardobida.

Agar matnda xato topsangiz, uni sichqoncha bilan belgilang va Ctrl+Enter tugmalarini bosing