HIV-i analüüs PCR-iga. PCR-i kasutamise põhimõtted HIV diagnoosimisel

Immuunpuudulikkuse viirus on ohtlik haigus, mida nimetatakse teenitult "kahekümne esimese sajandi katkuks". Seetõttu kulutatakse selle vaevuse vastu võitlemiseks ja ka selle uurimiseks tohutult raha ja ressursse. Fakt on see, et immuunpuudulikkuse viirust pole veel täielikult mõistetud. Uued avastused võimaldavad teadlastel välja töötada vaktsiine ja ravimid sellega tegelema. Kaasaegses meditsiinis pööratakse suurt tähelepanu selle haiguse diagnoosimise meetoditele. Üks kõige enam tõhusaid viise viiruse tuvastamisel tunnevad arstid üle maailma PCR-i ära. HIV-i puhul kasutatakse seda meetodit DNA-testimise teel. Mis see uuring on, milline on selle usaldusväärsus ja kuidas testiks valmistuda?

Mis on HIV PCR-test?

Kõigepealt peaksite selle lühendi dešifreerima. Polümeraasi ahelreaktsioon (HIV-i PCR-meetod) on diagnoos, mis pole meie riigi vabameditsiinis laialdast rakendust leidnud. Sellel on mitu põhjust. Kuid peamine on see, et sellised uuringud ei ole odavad. Samal ajal on selle efektiivsus ligikaudu kaheksakümmend protsenti, kui ensüümi immuunanalüüsi ja immuunblotanalüüsi usaldusväärsus on suurem. See on vahemikus üheksakümmend viis kuni üheksakümmend kaheksa protsenti. Loomulikult on HIV-i võimalik tuvastada PCR abil. Seda kasutatakse ka muudel eesmärkidel. DNA ja RNA uuringute abil tehakse kindlaks geneetilised ja pärilikud haigused ning nakkus- ja viirushaigused.

Mis on HIV PCR, mille usaldusväärsus, nagu eespool mainitud, on vaid kaheksakümmend protsenti ja miks see nii on diagnostiline meetod sai selle nime? Seda tüüpi uuringute jaoks kasutatakse mitut tüüpi bioloogilist materjali. Immuunpuudulikkuse viiruse puhul on see peamiselt veri. Samuti kasutatakse PCR-iga HIV-testi kogumiseks suguelundite sekretsiooni ja spermat. Sel juhul sülge ei uurita. Kuna see on ebaefektiivne. Sülg sisaldab väikeses koguses viirusrakke. Sama võib öelda uriini, higi ja pisarate kohta.

HIV – PCR tuvastab antigeeni või mitte? Seda küsimust küsivad sageli meditsiinitöötajad. Vastus sellele ei saa olla positiivne. Niivõrd kui seda meetodit diagnostika on suunatud täpselt DNA ja RNA uurimisele. Kvaliteetne HIV-i PCR viiakse läbi kindlas järjestuses. Väidetavalt nakatunult võetakse vajalik bioloogiline materjal. Kõige sagedamini võetakse selliseks uuringuks venoosne veri. Muide, patsiendil ei soovitata enne seda mitu päeva rasvaseid toite süüa. Uuring viiakse läbi tühja kõhuga. Bioloogiline materjal asetatakse spetsiaalsesse laborireaktorisse, kus see lagundatakse. Lisaks lisatakse bioloogilisele materjalile teatud ensüüme (need on iga haiguse või patoloogia puhul erinevad). Mikroobi, viiruse või infektsiooni koopia sünteesimiseks seonduvad need ensüümid nende DNA-ga.

See toimub mitmes etapis vastavalt ahelreaktsiooni põhimõttele. Esiteks saadakse ühest desoksüribonukleiinhappe molekulist kaks, miks neli jne. Pärast mitme uurimistsükli läbimist saab laborant uuritava materjali DNA-st sadu või tuhandeid koopiaid, tänu millele saab neid hõlpsasti võrrelda mis tahes patogeensete organismide, infektsioonide ja patoloogiate DNA-ga geneetilisel tasemel, sealhulgas immuunpuudulikkuse viirus. Tänu sellisele uuringule saavad patsiendid võtta PCR-i Esiteks HIV või teist tüüpi. Tema abiga on võimalik määrata ka viirusrakkude kontsentratsiooni inimese veres. Kui HIV-i PCR on positiivne, kuid sellele ei eelnenud immuunblotanalüüsi ega ELISA-sõeluuringut, suunatakse patsient seda tüüpi uuringutele. Kui polümeraasi ahelreaktsioonile eelnes üks ülaltoodud tüüpi uuringutest, pole meditsiinivaldkonna spetsialistidel kahtlust. Sel juhul määratakse inimesele konkreetne diagnoos. Kui HIV-i PCR on negatiivne, kuid arstidel on siiski kahtlusi, võib patsiendi saata ka täiendavatele uuringutele. Tuleb märkida, et selle diagnostikameetodi puhul tuvastatakse valepositiivne tulemus sagedamini kui vale-negatiivne. Oluline on teada, et PCR-i ei tehta HIV-i määrdumise või kraapimise meetodil.

Kust saab PCR-i HIV-i vereanalüüsi teha ja kas ma saan seda teha tasuta?

Nagu eespool mainitud, pole seda tüüpi uuringud Venemaal kuigi levinud. Ja selle põhjuseks on selle kõrge hind. See võimaldab järeldada, et tavalises osariigi polikliinikus on võimatu läbida HIV-i PCR-testi (HIV 2. ja 1. tüüpi PCR-i usaldusväärsus on sama). Selleks peate võtma ühendust spetsialiseeritud labori või tasulise kliinikuga. Suurtes linnades on spetsialiseerunud AIDS-i keskused, kus PCR-teste tehakse kaubanduslikul alusel. V asulad vähem võimalusi, kõigil pole seda tüüpi uuringuid, kuid selliste kohtade elanikud võivad alati külastada suuri linnu, et pöörata tähelepanu oma tervisele.

Kui kaua kulub HIV PCR testi tegemiseks pärast väidetavat nakatumist?

Selle kohta, kui kaua on võimalik HIV PCR-testi teha, küsivad nad sageli meditsiinispetsialistidelt. Sel juhul pole uuringute vahel vahet. Nii polümeraasi ahelreaktsioon kui ka ELISA test koos immuunblotanalüüsiga tuleks läbi viia mitte varem kui kolm kuni neli nädalat pärast väidetavat nakatumist. Enne seda perioodi pole mõtet uuringuid läbi viia. 10 päeva pärast HIV-d PCR-ga ei tuvastata.

Mõnel juhul võib infektsiooni tuvastada varem või hiljem kui määratud periood. Kuid see sõltub uuritava organismi spetsiifilistest omadustest. Oluline on teada, et polümeraasi ahelreaktsiooni abil on võimalik tuvastada mitte ainult nakatunud, vaid ka viiruse kandjaid. HIV PCR-i ajastus sõltub suuresti laborist, kus diagnoos tehakse. Keskmiselt on need mitte rohkem kui päev. Kuid on ka ekspressuuring, mis on vajalik vereülekande või erakorralise meditsiini jaoks.

HIV-nakkuse PCR-diagnostika roll neonatoloogias

HIV PCR testi kasutatakse neonatoloogias, kui nakatunud naistel on lapsed. Kõik teavad, et sel juhul on viiruse emalt lapsele edasikandumise oht äärmiselt suur. Kõigil vastsündinutel, kelle emad on nakatunud või immuunpuudulikkuse viiruse kandjad, on sünnihetkel immuunpuudulikkuse viiruse antikehad juba veres olemas, olenemata sellest, kas nakatumine on toimunud või mitte. HIV PCR-diagnostika abil saab tuvastada, kas tegemist on nn immuunsüsteemi kaitsega või infektsiooni tagajärjega. Väikelaste esimestel elupäevadel seda tüüpi uuringuid ei tehta. Lõppude lõpuks, kui nakatumine toimub sünnituse ajal läbi sünnitusteede, ei suuda kohe tehtud analüüs haigust tuvastada. Ta näitab seda ainult siis, kui nakkus oli emakasisene. HIV PCR täpsus vastsündinutel on samuti ligikaudu kaheksakümmend protsenti.

V viimased aastad Väga populaarseks on muutunud meetod HIV-i geenimaterjali tuvastamiseks spetsiifiliste geenijärjestuste replikatsiooni (amplifitseerimise, reprodutseerimise) abil, mida sageli kombineeritakse selle meetodi ühe variandi nime all, "polümeraasi ahelreaktsioon" (PCR).

PCR-meetod (polümeraasi ahelreaktsioon) põhineb NK (nii DNA kui ka RNA) ainulaadsel omadusel – võimel ise paljuneda, mida kunstlikult taastoodetakse in vitro. Sel juhul sünteesitakse ainult rangelt spetsiifilisi NA fragmente.

HIV-nakkuse etioloogiline tegur on viirused HIV-1 ja HIV-2 (inglise keeles Human Immunodeficiency Viruses) perekonnast Retroviridae. HIV-nakkuse patogenees seisneb CD-4 fenotüübiga rakkude viirusinfektsioonis, mis on omane abistaja-T-lümfotsüütidele ja mõnedele teistele inimkeha rakkudele. Immuunpuudulikkuse viiruse otsene tsütopaatiline toime nendele rakkudele viib lõpuks surmani oportunistlike infektsioonide aktiveerumise või kasvajate tekke tõttu.

HIV-nakkuse laboratoorset diagnostikat teostatakse kolmes suunas:

seroloogiline diagnostika viiruse markerid ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi ja immunoblotanalüüsiga, mis seisneb HIV-vastaste antigeenide ja antikehade määramises vereseerumis.

viiruse NK määramine(proviraalne DNA või RNA) PCR abil nii veres kui ka vererakkudes.

immuunseisundi uurimine(CD-4 lümfotsüütide kvantitatiivne hindamine), mida saab kõige adekvaatsemalt läbi viia voolutsütomeetria abil.

Eriti oluline on märkida PCR-i tähtsust HIV-nakkuse diagnoosimisel esimese eluaasta lastel. HIV-nakkuse varajane diagnoosimine selles vanuses lastel on põhimõtteliselt võimatu ilma PCR-i kasutamata. See on tingitud asjaolust, et HIV-nakkusega emalt sündinud lapsel on tingimata immuunpuudulikkuse viiruse antikehad. Ema ja enda HIV-vastaseid antikehi ei ole võimalik eristada. Nakatamata lapsel elimineeruvad need antikehad tema enda immuunsüsteemi mõjul 6-9 kuu vanuseks, kuigi mõnel juhul võivad nad ringelda kuni 18 elukuud, kuid mitte rohkem kui see periood.

Tuleb märkida, et PCR-uuringul on mõtet ainult siis, kui rinnaga toitmine laps on sünnihetkest HIV-positiivne ema, sest nakatumise oht on üsna kõrge ja ulatub umbes 5% -ni.

Seega võimaldab PCR lastel HIV-staatust diferentseerida. varajane iga... Seega, kui esimese 48 elutunni jooksul on immuunpuudulikkuse viiruse NK suhtes positiivne PCR-tulemus, tekkis HIV-nakkus emakas. Kui esimese 48 tunni jooksul on negatiivne PCR tulemus, kuid see muutub positiivseks 7-14 elupäeva vanuselt, siis on nakatumine toimunud sünnituse ajal.

Praegu võimaldab PCR mitte ainult diagnoosida, vaid ka jälgida HIV-nakkuse ravi, määrates RNA kontsentratsiooni plasmas, samuti tuvastada keemiaravi suhtes resistentseid immuunpuudulikkuse viiruse tüvesid. "Viiruse koormuse" määramine vereplasmas on parim prognostiline kriteerium HIV-nakkuse kulgemisel ja retroviirusevastase ravi efektiivsuse hindamisel.

Tuntud PCR-i modifikatsioonid HIV-nakkuse diagnoosimiseks saavutavad tundlikkuse vaid 98%, st tuvastavad ainult 98% HIV-nakkusega isikute proovidest, mis on oluliselt madalam kui ELISA kasutamisel (kuni 99,9%). Sel põhjusel ei saa neid kasutada kinnitavate testidena, kuna need annavad ilmselt rohkem valenegatiivseid tulemusi kui immunoblot. PCR tehnika käitub praktikas välisvibratsiooni suhtes liiga "tundlikuna" ning oskamatutes kätes ja ebapiisavalt hästi varustatud laboritingimustes annab arvestatava hulga mittespetsiifilisi (valepositiivseid) reaktsioone. PCR-i spetsiifilisus sõltub ka selles kasutatavate koostisosade valikust, eriti nn praimeritest, mis peaksid jäljendama "HIV geenijärjestusi", kuid neid ei saa alati täpselt valida. Ebaõnnestunud valik võib viia eelkõige selleni, et sellised testid võivad erineva eduga tuvastada HIV-1 erinevaid alatüüpe, näiteks tuvastada alatüüpi B, mitte tuvastada alatüüpe A ja G jne. Kuid nende meetodite arendamine toimub kiires tempos ja on võimalik, et peagi ilmuvad parema kvaliteediga standardreaktiivide komplektid. Praktikas peaksid arstid arvestama neile pakutavate diagnostiliste testide tööomadustega, eeldades esialgu, et nende väli (praktiline) väärtus võib olla tootjate deklareeritust oluliselt väiksem.

PCR-i teoreetiline eelis seisneb selles, et see suudab tuvastada HIV-nakkust inkubatsiooni- ja varajases kliinilises perioodil, mil antikehi ei pruugi veel esineda. Siiski ei saa see alati nakatunut tuvastada nakkuse hilisemal perioodil. See võib olla oluline tulevikus HIV-nakkuse diagnoosimisel retroviirusevastast ravi saavatel inimestel, kui HIV-i tase veres oluliselt langeb. Kahe meetodi – ELISA ja PCR – kombineeritud kasutamine, mis võiks olla sellest olukorrast väljapääs, muudab kahjuks uuringud tunduvalt kallimaks, eriti kui neid tehakse massiliselt.

HIV tuvastamine PCR abil veres on võimalik kahes versioonis:

HIV proviiruse DNA tuvastamine perifeerse vere mononukleaarsetes rakkudes;

HIV RNA tuvastamine bioloogilistes kehavedelikes (näiteks plasmas või seerumis).

Nüüd PCR HIV proviiruse DNA jaoks kasutatakse diagnostilise tehnikana HIV-nakkuse otseseks diagnoosimiseks järgmistel juhtudel:

Seroloogilise "akna" perioodil. Kuigi seda tuleks meeles pidada! et PCR-i tundlikkus HIV-i proviiruse DNA suhtes on vahemikus 96–99% ja seetõttu tuleks vaatamata kõrgetele tundlikkuse näitajatele PCR läbi viia kas koos ELISA-ga või hilisema ELISA-ga kinnitamisega;

Küsitava IS tulemuse korral;

HIV-nakkusega emadele sündinud laste uurimisel. PCR kasutamine võimaldab sel juhul vähendada HIV-nakkuse diagnoosimiseks kuluvat aega 18 kuult 3-6 kuuni.

Oluline on teada HIV-testimise olukordade loetelu, millal see on kohustuslik. Inimese immuunpuudulikkuse viirust iseloomustab kõrge võime immuunsüsteemi tugevalt maha suruda, mis põhjustab ohtliku AIDS-i haiguse arengut, mis ähvardab patsiendi surma. Õigeaegne diagnoosimine võimaldab haigust varakult avastada, samuti parandada patsiendi elu prognoosi. Kaasaegses meditsiinis on suur HIV-diagnostika meetodite arsenal, mida saab teha anonüümselt.

Näidustused analüüsiks

Igaüks, olenemata vanusest ja soost, võib teha iseseisva otsuse HIV-testimise kohta.

On mitmeid tingimusi, mille korral peate HIV-i suhtes tõrgeteta testima:

• Pärast seksi (eriti kui ilma kaitseta) uue partneriga.
• Kiire kaalulangusega.
• Pärast vägistamist.
• Pärast manipuleerimist ja süstimist küsitava steriilsusega süstaldega.
• Enne operatsiooni.
• Enne patsiendi statsionaarsele ravile suunamist.
• Veredoonoritelt ja siseorganitelt.
• Kui teie pereliikmetel on varem diagnoositud HIV.
• Kui ühel või mõlemal partneril on sugulisel teel levivaid haigusi.

• Lümfisõlmede pikaajalise turse korral.
• Sagedaste viirus- ja külmetushaigustega, sealhulgas lastel.
• Raseduse ajal on analüüs vajalik 12. nädalal registreerimisel ja 30. rasedusnädalal.
• Püsivate kopsupõletiku retsidiivide korral.
• Kopsutuberkuloos.
• Soor, mis ei allu ravimitele.
• Pikaajaline palavik.
• Kõhulahtisus, mis kestab pikka aega.
• Pärast vereülekannet või siseorganite siirdamist.

Rühm inimesi, kellel on suurenenud HIV-nakkuse risk ja keda tuleb testida kord iga 3 kuu järel:

• meditsiinitöötajad;
• lapsed, kes on sündinud HIV-nakkusega naistele;
• homoseksuaalid;
• seksiteenuste tööstuse töötajad.

Verd saab loovutada vastavalt näidustustele, olles saanud arstilt saatekirja või omal soovil.

Mitme päeva pärast HIV-testi teha?

Analüüsimeetodid ja usaldusväärsete tulemuste saamise periood

Immuunpuudulikkuse viiruse tuvastamiseks kasutatakse kõige sagedamini järgmisi analüüsimeetodeid:

• PCR on polümeraasi ahelreaktsiooni meetod, mis põhineb immuunpuudulikkuse viiruse DNA ja RNA piirkondade tuvastamisel;
• ELISA ja immunoblotanalüüs - seotud HIV-vastaste antikehade tuvastamisega;
• teatud lümfotsüütide arvu uurimine digitaalse fluorimeetria abil.

PCR-meetodit kasutatakse sagedamini haiguse varajaseks või erakorraliseks diagnoosimiseks. See on eriti oluline vastsündinutele esimesel elupäeval ja lastele esimesel eluaastal. Viiruse DNA ja RNA tuvastamine on parim meetod määrata käimasoleva ravi mõju. Lisaks võimaldab sellise analüüsi läbiviimine täpselt kindlaks teha lapse nakatumise perioodi.

Minimaalne aeg, mille möödudes on võimalik teha HIV-testi täiskasvanutel ja vanematel lastel PCR meetodil, on 10-16 päeva pärast eeldatavat nakatumise hetke.

Haiguse alguses võivad ELISA meetodil tehtud uuringu tulemused olla negatiivsed, kuna esimestel nädalatel on antikehade tootmine veel väga nõrk. Usaldusväärsete tulemuste saamiseks peaksite teadma, mitu päeva pärast võimalikku nakatumist peaksite HIV-testi tegema. ELISA uuringu tegemisel saab esimese testi teha 6 nädala pärast, teise testi 3 kuu pärast. On kindlaks tehtud, et HIV-nakatunud inimeste veres koguneb piisav antikehade kontsentratsioon 3 kuud pärast nakatumise hetke.

Tähtis! HIV-i positiivse tulemuse puudumist viiruse olemasolul kehas võib täheldada mitmest nädalast kuni kuue kuuni. Tuleb mõista, et sel perioodil nakatuvad teised inimesed tuntud meetoditega aktiivselt.

Aega nakatumisest positiivse HIV-testini nimetatakse aknaperioodiks.

Analüüsimaterjali kogumise tunnused ja valepositiivsete tulemuste põhjused

Selleks, et iga HIV-testi tulemused oleksid võimalikult usaldusväärsed, on oluline järgida analüüsiks materjali esitamise reegleid. Enamiku kõige laialdasemalt kasutatavate tehnikate puhul kasutatakse venoosset verd. Testi tulemused on valmis 3-10 päeva pärast sünnitust. Kui ELISA abil saadakse HIV-i suhtes positiivne tulemus, on kohustuslik teine ​​kinnitav uuring immunoblotanalüüsiga.

Õppetöö ettevalmistamise reeglid:

1. Ärge sööge 8 tundi enne testi tegemist.
2. Soovitatav on anda verd tühja kõhuga. Hädaolukordades on lubatud sellest reeglist mitte kinni pidada.
3. Vere loovutamise eelõhtul on lubatud juua ainult puhast vett või magustamata teed.
4. Ühe päeva jooksul on soovitatav piirata praetud, vürtsikute ja rasvaste toitude, samuti alkohoolsete jookide kasutamist.

HIV-testi võimalikud tulemused:

• negatiivne - viiruse antikehi ega struktuuriüksusi ei leitud;
• vale negatiivne - negatiivne tulemus viiruse esinemise taustal kehas. Kõige sagedamini saadud hiljutise inimese nakatumise ja aktiivse viirusevastase ravi korral;
• positiivne - tuvastatakse viiruse või DNA antikehad;
• valepositiivne - positiivne testitulemus viiruse puudumise taustal organismis.

HIV-testi valepositiivse tulemuse põhjused:

• kroonilised infektsioonid;
• hepatiit;
• seksuaalsel teel levivad haigused;

• Rasedus;
• analüüsiks võetud vere või uriini ebaõige ladustamine;
• diabeet;
• kollagenoos;
• autoimmuunsed patoloogiad;
• onkoloogilised haigused;
• liiga nõrgenenud immuunsus, sealhulgas HIV-nakkuse pikaajalise ravi korral.

Tähtis! Kui saadakse valepositiivsed tulemused, tuleb testi korrata 3 nädala pärast.

Nakatumise ohuga toimingute algoritm:

1. 6 nädalat pärast tõenäolist nakatumist annetage anonüümselt verd analüüsimiseks mis tahes meditsiiniasutuses.
2. Kui tulemused on negatiivsed, korrake testi 3 kuu pärast.
3. Kui tulemus on positiivne, saadetakse patsient spetsialiseeritud keskusesse, kus ta viib läbi teise analüüsi ning osutab psühholoogilist ja meditsiinilist abi.
4. Kui kordusanalüüs pärast positiivset testi on negatiivne, eemaldatakse patsient registrist.

Mõnes riigis saab HIV-i tuvastada mitte ainult vereanalüüside, vaid ka sülje või uriiniga. Sellised tehnikad on kallid.

ELISA ja PCR meetoditega diagnoositakse mitmeid sugulisel teel levivaid haigusi.

Uuringuks valmistumisel on patsientidel ebasoovitav süüa kahe päeva jooksul rasvaseid toite. Nagu vereanalüüs viiruste suhtes, võetakse proovid tühja kõhuga, viimane söögikord oli hiljemalt 8 tundi tagasi. Eemaldage dieedist praetud ja alkohol. Järgides neid lihtsaid nõudeid, lähendate oma uuringutulemused täpsematele.

Avastatud haiguste loend sisaldab:

• inimese papilloomiviirus (HPV);
• klamüüdia;
• herpes (herpese jaoks on ette nähtud täiendav vereanalüüs);
• ureaplasma;
• mükoplasma;
• gonorröa;
• tsütomegaloviirus;
• trihhomonoos;
• toksoplasmoos.

HIV-i PCR infektsioonide diagnostikas

Kuna teadaolevalt puuduvad ainult HIV-nakkusele iseloomulikud sümptomid, siis ainult pöördunud patsiendi kaebuste põhjal ei ole võimalik HIV-nakkust ära tunda.

HIV-testimine on muutunud hädavajalikuks, sest kaasaegne arvamusühiskond selle haiguse kohta taandub tõsiasjale, et AIDSi peetakse surmaotsuseks. Oli juhtumeid, et pärast ebaregulaarseid seksuaalkontakte pöörab inimene kõrgendatud tähelepanu oma keha signaalidele, leides ja sageli leiutades uusi surmaga lõppenud haiguse tunnuseid.

Laboratoorsed uuringud on praegu ainus ja kõige usaldusväärsem diagnostiline võimalus (HIV-i vereanalüüs). Kasutage PCR-i järgmiste terviseprobleemide tuvastamiseks:

• HIV-i olemasolu kinnitamiseks või ümberlükkamiseks seronegatiivse akna ajal;
• immunobloti kahtlase tulemusega (patoloogilise protsessi täpse kirjelduse loomiseks);
• HIV-1 või HIV-2 genotüübi kindlakstegemisel;
• määrata ja jälgida organismi viiruskoormust;
• HIV-staatuse tuvastamiseks vastsündinutel, kelle emad on HIV-i kandjad;
• koos vereülekandega.

PCR-meetodi paremus nakkushaiguste diagnoosimisel:

Taotleja kehtestamisel meditsiinilist abi HIV-nakkuse jaatava tulemusega patsiendil hakatakse läbi viima patsiendi sügavamaid uuringuid, et selgitada ja selgitada haiguse olemust ja kulgu, samuti sekundaarsete haiguste alust ja olemust, immuunsuskahjustuse taset.

ELISA ja PCR analüüsid: uurimise omadused, põhimõtted ja dekodeerimine

Analüüsiks võetakse veri veenist. Raseduse ajal võetakse AIDSi avastamiseks vereproove rangelt. Järeldused immuunpuudulikkuse viiruse puudumise või esinemise kohta patsiendi kehas tehakse antikehade olemasolu või puudumise tulemuste põhjal. ELISA-d ei tohiks teha kohe pärast nakkuse kahtlust, vaid mõne aja pärast, et patsiendi veres tekiksid antikehad. Möödub erinevatel põhjustel 3 nädalast 3 kuuni.

Lisaks selgus, et ELISA tulemus võib olla nii valepositiivne kui ka valenegatiivne. Koos väga varajane diagnoosimine kahtlustatava infektsiooni korral, kui HIV-vastaseid antikehi pole veel ilmunud, saadakse valenegatiivne tulemus. Sellistel juhtudel peate selgituse saamiseks võtma 1-3 kuu pärast uuesti HIV-i verd.

Valepositiivse tulemuse, vastupidi, võib saada juhul, kui taotletud patsiendil on kroonilised infektsioonid, onkoloogilised haigused, autoimmuunhaigused, lisaks loetletutele on normist kõrvalekalded võimalikud ka muudes olukordades. Seega, kui ELISA tulemus on jaatav, kontrollitakse seda kindlasti kõige vastuvõtlikumatel viisidel.

PCR-diagnostika on üks kaasaegsemaid kõrgtehnoloogilisi uurimismeetodeid ja seda kasutatakse sageli nakkushaiguste avastamiseks. DNA diagnostika on hõlmanud mitmeid erinevaid uuringute läbiviimise meetodeid, tänapäeval on populaarsem polümeraasi ahelreaktsiooni ehk PCR meetod.

See meetod põhineb selle infektsiooni tekitaja DNA väikese osa leidmisel kudedest mikrouuringuks. Samal ajal sisaldab väike osa DNA-st kuni mitmesajaseid DNA paare, mis on ranges järjekorras.

PCR-meetod on kõige täpsem, selle abil on võimalik kindlaks teha viiruse olemasolu, olenemata sellest, kas antikehad on tekkinud või mitte. Kuid vaatamata täpsusele on meetodil üks oluline puudus, mis on tingitud just selle suurenenud täpsusest. Tõenäosus, et tulemus on vale, on üsna suur. Seetõttu kasutatakse selle meetodiga seoses ja lisaks sellele ka muid meetodeid geeni- ja antigeensete materjalide tuvastamiseks.

Hepatiidi diagnoosimise olemus PCR abil

Maksahaigusi põhjustavad viis tõestatud viirust. Need on tuntud A-, B-, C-, D-, E-hepatiidi viirused. Väga harvad on juhud, kui hepatiiti põhjustab Epstein-Barri viirus, mis on tegelikult teatud tüüpi herpes. Loetletud viirused on erinevate perekondade esindajad, mis mõjutab nende ravi sõltuvalt hepatiidi tüübist.

HIV PCR analüüs on üks diagnostilistest etappidest. HIV on üks raskemaid haigusi. Selle olemust ei mõisteta täielikult, kuid teadlased ei lõpeta oma uurimistööd. Õigeaegseks tegutsemiseks on vaja tegeleda diagnostikameetodite täiustamisega. HIV PCR-test on osutunud üsna tõhusaks. Uuritakse makromolekule, mis edastavad teavet pärilikkuse teel. Millist teavet saavad spetsialistid?

Analüüs

PCR dešifreeritakse polümeraasi ahelreaktsioonina. Seda meetodit kasutatakse HIV-nakkuse diagnoosimiseks. Eksperdid peavad seda üsna tõhusaks: analüüsiandmete täpsus on 80%. Ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (või ELISA) läbiviimisel on see 95–98%.

Ahelreaktsiooni abil tuvastatakse erinevad nakkushaigused. See kehtib ka haiguste kohta, mis levivad geneetilisel tasandil.

Kuidas analüüsi tehakse:

1. PCR-uuringu läbiviimiseks võetakse bioloogiline materjal. HIV-testi tegemisel on vaja uurida patsiendi verd.
2. Lisaks viiakse läbi meeste sperma ja naiste suguelundite sekretsiooni analüüs.

Testi tulemused ei ole antigeeni tuvastamine.

See kontrollib DNA-d ja RNA-d:

1. Uuring nõuab teatud järjestuse järgimist:
2. Mõni päev enne analüüsi peab patsient piirama rasvase toidu tarbimist.
3. Veri võetakse veenist tühja kõhuga.
4. Spetsiaalses reaktoris lagundatakse bioloogiline materjal spetsiaalsete ensüümide lisamisega, mis täidavad siduvat rolli ja sünteesivad erinevaid infektsioone.
5. Analüüs viiakse läbi etapiviisiliselt, kuna molekulide aritmeetiline progressioon suureneb. Selle tulemusena saadakse uuritavatest rakkudest sadu koopiaid. Sellele järgneb HIV-i võrdlemine ja tuvastamine.

Viirushaiguste (näiteks HIV-nakkuse) avastamiseks on vaja kasutada täpset diagnostikat. Õige ja õigeaegne diagnoos aitab välja kirjutada tõhus ravi ja see mõjutab patsiendi elukvaliteeti ja selle kestust.

Uuringu eesmärk

Teatud näidustuste korral on HIV-i laboratoorsed testid võimalikud. Tavaliselt on see mis tahes operatsioon või arstlik läbivaatus enne lapse eostamist. Mõned erialad nõuavad süstemaatilist tervisekontrolli. See on tingitud tegevuse liigist, näiteks toiduainetööstuse töötajad, lastehoiuasutused, tervishoiutöötajad. Nende meditsiinilistes dokumentides on HIV-testi kohta kindlasti märge.

Kuid olenemata tööst või vanusest on sümptomite ilmnemisel vaja selliseid teste läbi viia:

1. Dramaatiline kaalulangus.
2. Pikaajaline soolehäire - rohkem kui 20 päeva.
3. Palavik ilma nähtava põhjuseta.
4. Mitme lümfisõlme märgatav suurenemine korraga.
5. Verehaigused.
6. Komplekssed haigused, mis tekivad viiruse sisenemisel kehasse.

Materjali kogumine PCR analüüsi jaoks on üsna kiire. Venoosne veri võetakse süstlaga, tuleb kindlasti järgida kõiki desinfitseerimismeetmeid ja kasutada veeni sisenemise koha tihendamiseks spetsiaalset plaastrit.

Taastumiseks peab patsient pärast vere loovutamist sööma tüki šokolaadi ja jooma magusat teed. See aitab vältida võimalikku nõrkust. Vastasel juhul võib tekkida minestamine.

Analüüsi saab teha vastavalt spetsialisti ettekirjutusele või teie enda soovil igas kliinikus.

Analüüsi omadused

Analüüsi tulemuste põhjal teeb järelduse ainult arst. Te ei saa ise ravida ja saadud tulemusi iseseisvalt tõlgendada. Diagnoos tehakse individuaalselt ja määratakse ka ravikuur.

Kui patsient oskab arvata võimaliku infektsiooni kohta, saab PCR-i teha umbes kuu aja pärast. Varasemad näitajad on ebatäpsed. Mõnikord esineb varajase avastamise juhtumeid, kuid see sõltub inimesest.

Mitu päeva oodata tulemusi? Tavaliselt valmivad need 24 tunni jooksul ehk järgmisel päeval. Vajadusel saab teha kiiruuringuid. PCR-meetod võimaldab teil saada uuringu tulemused 4 tunni pärast.

PCR-meetodi kasutamisel tuvastatakse täpselt nakkuse põhjustaja. Ühe katsematerjali abil on võimalik tuvastada isegi mitu erinevat patogeeni. Viga on praktiliselt välistatud.